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活性氧介导的线粒体途径参与α-hederin诱导的肝癌细胞凋亡

2018-05-14MedSci网
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核心提示:α-hederin皂苷通过增加细胞内活性氧介导的线粒体途径诱导HCC细胞凋亡,或是治疗人类HCC的一种有效方法。

  本研究旨在探究体外和体内α-hederin在肝细胞癌(HCC)细胞中的抗肿瘤活性及其作用机制。

  使用α-hederin(0,5μmol/L,10μmol/L,15μmol/L,20μmol/L,25μmol/L,30μmol/L,35μmol/L,40μmol/L,45μmol/L,50μmol/L,55μmol/L或60μmol/L)处理SMMC-7721、HepG-2和Huh-7HCC细胞 12 h、24 h或36 h,然后细胞计数试剂盒-8检测细胞活力。使用0,5μmol/L,10μmol/L或20μmol/L的α-hederin处理SMMC-7721细胞24小时,加入或不加DL-丁硫氨酸-S,R-亚砜氧化胺(2mmol/L)或N-乙酰半胱氨酸(5 mmol/L)预处理2小时,随后进行其他测试。Hoechst染色后观察到凋亡。使用GSH和ATP测定试剂盒测量谷胱甘肽(GSH)和三磷酸腺苷(ATP)水平。通过测量2',7'-二氯荧光素二乙酸酯的氧化转化来测定细胞内活性氧(ROS)水平。使用JC-1染色评估线粒体膜电位的中断。Western blotting检测Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、凋亡诱导因子和细胞色素C的蛋白水平。在异种移植肿瘤模型中评估了α-hederin体内的抗肿瘤功效。

  结果显示,α-hederin处理诱导HCC细胞凋亡。对照组中低剂量α-hederin(5μmol/L)、中剂量α-hederin(10μmol/L)和高剂量α-hederin(20μmol/L)凋亡率分别为0.90%±0.26%、12%±2.0%、21%±2.1%和37%±3.8%(P <0.05)。α-hederin处理可降低细胞内GSH和ATP水平,诱导ROS,破坏线粒体膜电位,提高Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、凋亡诱导因子和细胞色素C蛋白水平,降低Bcl- 2的表达。α-hederin处理也抑制体内异种移植肿瘤的生长。

  综上所述,该研究结果表明,α-hederin皂苷通过增加细胞内活性氧介导的线粒体途径诱导HCC细胞凋亡,或是治疗人类HCC的一种有效方法。

乙酰半胱氨酸

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